1.?需檢查的供試品如在分裝后?24?小時以(yi)內進行支原體檢查者(zhe)可貯存(cun)(cun)于?2~8℃;超過24?小時應置-20℃以(yi)下貯存(cun)(cun)。
2.?檢(jian)查支原體(ti)采(cai)用支原體(ti)肉(rou)湯培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)和支原體(ti)半(ban)流體(ti)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)。半(ban)流體(ti)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)在使(shi)用前(qian)(qian)應煮沸10~15?分(fen)鐘,冷(leng)卻至?56℃左右,然(ran)后(hou)加入滅能小(xiao)牛(niu)血(xue)清(培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji):血(xue)清比例(li)為(wei)?8:2;也可(ke)使(shi)用經驗證過的(de)其它血(xue)清),并可(ke)根據需(xu)求加入適量青(qing)霉(mei)素,充分(fen)搖勻。肉(rou)湯培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)除無需(xu)煮沸外,使(shi)用前(qian)(qian)需(xu)同樣補加上述成分(fen)。
3.?取每支(zhi)(zhi)裝量?10 ml(含(han)?2ml?血清)的(de)(de)支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)肉湯培(pei)(pei)(pei)養基(ji)(ji)各(ge)?4?支(zhi)(zhi)、相(xiang)應(ying)的(de)(de)支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)半流(liu)體(ti)(ti)培(pei)(pei)(pei)養基(ji)(ji)各(ge)?2?支(zhi)(zhi)(已(yi)冷至?36℃±1℃),每支(zhi)(zhi)培(pei)(pei)(pei)養基(ji)(ji)接(jie)種供試(shi)品?0.5~1.0 ml,置(zhi)?36℃±1℃培(pei)(pei)(pei)養?21天(tian)(tian)。于接(jie)種后的(de)(de)第?7?天(tian)(tian)從?4?支(zhi)(zhi)支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)肉湯培(pei)(pei)(pei)養基(ji)(ji)中(zhong)各(ge)取?2?支(zhi)(zhi)進(jin)行(xing)次(ci)代培(pei)(pei)(pei)養,每支(zhi)(zhi)培(pei)(pei)(pei)養基(ji)(ji)分別轉種至相(xiang)應(ying)的(de)(de)支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)半流(liu)體(ti)(ti)培(pei)(pei)(pei)養基(ji)(ji)及支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)肉湯培(pei)(pei)(pei)養基(ji)(ji)各(ge)?2?支(zhi)(zhi),置(zhi)?36℃±1℃培(pei)(pei)(pei)養?21?天(tian)(tian),每隔(ge)?3?天(tian)(tian)觀(guan)察?1?次(ci)。
4. 結果觀察:培養結束后,如接種供試品的培養基均無支原體生長,則供試品判為合格;如疑有支原體生長,可取加倍量供試品復試,如無支原體生長,供試品判為合格,如仍有支原體生長,則供試品判為不合格。?