1.?需檢查(cha)的供試品如在分(fen)裝后(hou)?24?小(xiao)時以(yi)內(nei)進行支原(yuan)體檢查(cha)者可(ke)貯(zhu)存于?2～8℃；超(chao)過24?小(xiao)時應置-20℃以(yi)下貯(zhu)存。

2.?檢查支(zhi)原(yuan)體(ti)采用(yong)支(zhi)原(yuan)體(ti)肉湯培(pei)養基(ji)(ji)(ji)和支(zhi)原(yuan)體(ti)半(ban)流體(ti)培(pei)養基(ji)(ji)(ji)。半(ban)流體(ti)培(pei)養基(ji)(ji)(ji)在(zai)使用(yong)前(qian)應煮(zhu)沸(fei)10～15?分(fen)鐘，冷卻至?56℃左(zuo)右，然后加入(ru)滅能小牛血清(qing)（培(pei)養基(ji)(ji)(ji)：血清(qing)比例為?8：2；也可(ke)使用(yong)經驗證過的其它血清(qing)），并可(ke)根(gen)據需求加入(ru)適量青霉(mei)素，充分(fen)搖(yao)勻。肉湯培(pei)養基(ji)(ji)(ji)除無(wu)需煮(zhu)沸(fei)外，使用(yong)前(qian)需同樣補加上述成(cheng)分(fen)。

3.?取每(mei)支(zhi)(zhi)裝量?10 ml（含?2ml?血清）的(de)支(zhi)(zhi)原(yuan)體肉(rou)湯(tang)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)各(ge)?4?支(zhi)(zhi)、相應(ying)(ying)的(de)支(zhi)(zhi)原(yuan)體半流體培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)各(ge)?2?支(zhi)(zhi)（已(yi)冷至?36℃±1℃），每(mei)支(zhi)(zhi)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)接種供試品?0.5～1.0 ml，置?36℃±1℃培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)?21天(tian)。于接種后的(de)第?7?天(tian)從?4?支(zhi)(zhi)支(zhi)(zhi)原(yuan)體肉(rou)湯(tang)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)中各(ge)取?2?支(zhi)(zhi)進行次代培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)，每(mei)支(zhi)(zhi)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)分別轉種至相應(ying)(ying)的(de)支(zhi)(zhi)原(yuan)體半流體培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)及(ji)支(zhi)(zhi)原(yuan)體肉(rou)湯(tang)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)各(ge)?2?支(zhi)(zhi)，置?36℃±1℃培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)?21?天(tian)，每(mei)隔?3?天(tian)觀察?1?次。